Ведет историю от созданного в 1979 году 224-го отдельного транспортного авиаотряда, занимавшегося перевозкой грузов во время войны в Афганистане. С 1990-х годов работает как авиакомпания. Специализируется на авиаперевозках в РФ и за рубежом крупногабаритных грузов: промышленного и нефтегазового оборудования, военной техники, гусеничной техники, изделий космической отрасли и др. Имеет лицензию на грузовое десантирование с малых и предельно малых высот.
Основными заказчиками на сайте авиакомпании значатся администрация президента РФ, особый летный отряд «Россия», «Рособоронэкспорт» и РСК МИГ. По данным Росавиации на январь 2018 года, авиакомпания эксплуатирует два самолета Ан-124–100 «Руслан» и 11 самолетов Ил-76МД. По данным «СПАРК-Интерфакса», ОАО 224 ЛО на 100% принадлежит подконтрольному Минобороны АО «Гарнизон» (бывший «Оборонсервис»). По последним доступным данным, выручка в 2015 году составляла 1,9 млрд руб., чистая прибыль — 42 млн руб.
В 2013–2017 годах предприятие заключило 32 госконтракта на сумму 5,8 млрд руб. Персонал ОАО 224 ЛО составляет 650 человек. Гендиректор — Владимир Михейчик.