Тимошенко родилась 27 ноября 1960 года в Днепропетровске. После окончания местного университета в 1984 году сначала работала инженером- экономистом на машиностроительном заводе, а в конце 80-х годов ушла в бизнес, открыв с мужем видеосалон.
Ее деловая хватка особо проявилась, когда она на основе корпорации "Украинский бензин" создала в 1995 году крупную бизнес-структуру "Единые энергетические системы Украины". К 1997 году эта структура и сама Тимошенко стали играть важную экономическую и политическую роль на Украине. В украинских СМИ это связывали с тем, что ей покровительствовал бывший губернатор Днепропетровской области Павел Лазаренко. Возглавив правительство Украины, он помог Тимошенко перебраться в Киев, где предоставил ее бизнесу режим полного благоприятствования.
Сейчас экс-премьер Украины находится в США и обвиняется по целому ряду преступлений, связанных с отмыванием денег, мошенничеством. Киев требует возвращения им свыше $200 млн.
В конце декабря 1999 года Тимошенко была назначена вице-премьером в правительстве Виктора Ющенко, курируя топливно-энергетический комплекс. В январе 2001 года она была уволена, а 13 февраля арестована. Провела под стражей 42 дня. В январе 2005 года все обвинения против нее за незаконные действия на энергорынке были сняты.
Во время "оранжевой" революции Тимошенко стала главным пропагандистом и агитатором на Майдане. После избрания Виктора Ющенко президентом страны, он 24 января 2005 года назначил Тимошенко и.о. главы правительства. 4 февраля верховная рада утвердила ее на этом посту голосами 373 депутатов. Однако уже 8 сентября Ющенко подписал указ о прекращении полномочий премьер-министра Юлии Тимошенко и отставке кабинета министров.
Объясняя свой шаг, президент тогда сказал: "Я решил разрубить этот Гордиев узел, как ни тяжело мне это делать. Страна девальвирует на глазах. Мои друзья были наделены большими полномочиями, но они не оправдали доверия". Причиной отставки Тимошенко и ее правительства стал коррупционный скандал, который затронул также близкое окружение президента.